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细胞周期与凋亡检测试剂盒检测

作者:荀彧 时间:2022-12-05 来源:互联网

中文名称:细胞周期与凋亡检测试剂盒

英文名称:

产品规格:50次/200次/500次

发货周期:1~3天

产品原理:本产品检测原理基于碘化丙啶(Propidium, PI)染色方法分析细胞周期和凋亡。碘化丙啶是一种双链DNA染料,其嵌入双链DNA中可以产生荧光,并且荧光的强度和双链DNA的量成正比。

在细胞周期中,G0和G1期细胞有一套染色体,G2和M期细胞有两套染色体,S期介于两者之间。经过碘化丙啶染色后,处在不同细胞周期中的细胞的荧光强度是不一样的。假定G0和G1期的细胞荧光强度为1,那么G2和M期的细胞的荧光强度为2,S期的细胞介于1和2之间。

细胞凋亡时,由于细胞核皱缩和DNA片段化,染色时DNA片段会从打孔的细胞膜处丢失,流式细胞仪检测时,荧光强度小于1,即Sub-G1峰或者凋亡细胞峰。

细胞凋亡也可以用流式细胞仪观察细胞光散射的变化来检测。凋亡前期,染色质皱缩,细胞密度增加,前向角光散色显著降低。凋亡后期,细胞产生凋亡小体,前向角光散射和侧向角光散色都显著降低。

产品适用:本试剂盒可用于培养的贴壁细胞或者悬浮细胞检测,也可用于组织细胞检测。

保存条件:-20°避光条件下,保存1年以上,4°避光条件下,可以保存2个月。
注意事项:

1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。

2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。

3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。

4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5、*好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。

6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。

7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。*好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。

8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。

9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。

11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。

操作规程:

1、在96孔板加入细胞00μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入00微升5000~0000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~0μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×00

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)

对羟基乙酰(标准品)英文名称: Dolasetron mesylate 8号染色体开放阅读框72抗体包装5g

多尼培南(标准品)英文名称: Doxepin HCl 7号染色体开放阅读框30抗体包装5MG

多潘立酮(标准品)英文名称: Doxepin HCl 7号染色体开放阅读框57抗体包装1g

多索茶碱(标准品)英文名称: Duloxetine hcl7号染色体开放阅读框36抗体包装1g

多效唑(标准品)英文名称: Duloxetine hcl7号染色体开放阅读框42抗体包装1g

鹅去氧胆(标准品)英文名称: Dutasteride7号染色体开放阅读框43抗体包装5g

厄贝沙坦(标准品)英文名称: Dutasteride7号染色体开放阅读框44抗体包装1g

厄多司坦(标准品)英文名称: Edaravone8号染色体开放阅读框40抗体包装5g

恩诺沙星(标准品)英文名称: Edaravone8号染色体开放阅读框37抗体包装1g

恩曲他滨(标准品)英文名称: Hydroquinidine8号染色体开放阅读框45抗体包装10g

恩替卡韦(标准品)英文名称: EpinastineHCl8号染色体开放阅读框80抗体包装50g

二基-(2-)(标准品)英文名称: EpinastineHCl9号染色体开放阅读框3抗体包装1g

二基-(2-)(克霉唑杂质I,标准品)英文名称: Eplerenone8号染色体开放阅读框47抗体包装250mg

二酮(标准品)英文名称: Eplerenone8号染色体开放阅读框48抗体包装25ml

二倍他米松(标准品)英文名称: Etodolac8号染色体开放阅读框58抗体包装25g

苏云金芽孢杆菌Bacillus│thuringiensis 质量规格:>98%胸腺嘧啶核苷磷化试剂盒喜树碱;Camptothecine

鲜绿青霉Penicillium│viridicatum 质量规格:≥580IU/ mg,BR胸腺基质淋巴生成试剂盒新橙皮苷二氢查尔酮;Neosperidi

淡紫拟青霉Paecilomyces│lilacinus 质量规格:含量测定胸腺活化调节趋化因子试剂盒西红花苷II;Crocin II
细胞周期与凋亡检测试剂盒盐三乙胺

其他 三乙胺盐盐;2,2',2''-次氮基三乙盐盐

英文名称: Triethanolamine hydrochloride

其他英文名称: Tri(hydroxyethyl)amine hydrochloride;2,2′,2″-Trihydro- xytriethylaminehydrochloride

产品规格: CP,99%

包装:100克

CAS号:637-39-8

C6H15NO3•HC1=185.65

级别:CP

含量:≥99.0%

熔点:177~188℃

溶解性试验:合格

性状:结晶。有吸湿性。易溶于水,*微溶于乙

用途:生化研究。测量锡和锑。软化剂。合成树脂。

保存:RT,避光


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