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蚯蚓急性毒性试验有效性

对照组的死亡率在试验结束时不能超过10%，试验是有效的。

5仪器设备

试验室常规仪器设备和特殊设备：

——蚯蚓养殖（见附录A）；

——滤纸：80g／～85g／，厚度左右，中级；

——人工土壤试验基质。

泥炭藓灰10% （pH值尽可能接近～，无明显植物残体，磨细，风干，测定含水量）；

高岭黏土20%（高岭石质量分数大于30%）；

石英砂70%（50μm～200μm粒径的细砂质量分数在50%以上）；

加入碳酸钙调pH值为±（见参考文献（6））；

以正确比例混合人工土壤的各个干燥组分。为了混合均匀，可采用大型试验室搅拌器或小型水泥电动搅拌机。然后取少量上述样品置于105条件下烘干称重，测定其含水量。加入去离子水使其含水量达到干重的35%左右，混合均匀。混合物不能过湿，当挤压人造土壤时不能有水分出现。

——玻璃容器：结晶皿，或加有盖玻璃或具孔塑料板的1L烧杯。

——培养装置：光照度400lx～800lx，温度控制±2的培养箱。

试验生物

推荐的蚯蚓品种是赤子爱胜蚓Eisenia foefida（Michaelsen），虽然这种蚯蚓不是典型的土壤品种，但它存在于富含有机质的土壤中，对化学物质的敏感性与真正栖息在土壤中的蚯蚓类似，其生命周期短，在20的条件下，孵化需要3～4周，7～8周即可发育成熟。它繁殖能力强，一条蚯蚓可以在一周内产2～5个蚓茧，每个蚓茧可孵出几条蚯蚓。它易于在含各种有机废物的土壤中饲养，蚓茧容易购得或从一个来源分发，这有利于确保采用同一品系（见附录A）。

赤子爱胜蚓存在两个分支，有些分类学家将其分开（见参考文献（1）），其形态很相象，但的环节上有一典型的横纹或环带，而 andrei则没有，但带有斑驳的红色。如果可能宜采用 foetida。当必须使用某种方法时，也可以使用其他品种。

选择二月龄以上，体重300 mg～600 mg的健康蚯蚓供试验用。

6试验方法

滤纸试验

采用长8cm，直径3cm的平底玻璃管。内壁衬铺滤纸，滤纸的大小以不重叠为宜。

受试物溶于水（溶解度大于1000mg／L）或适宜的有机溶剂（如丙酮、正己烷、氯仿），在已知浓度范围内配成浓度系列溶液。用移液管向每个玻璃管移入1mL受试物溶液，用过滤的压缩空气吹干，气体流速不要太快。在干燥过程中，水平旋转玻璃管（对不易溶解于水或有机溶剂中的物质必须重复几次上述过程），以获得试验所需的受试物在滤纸上的沉积量。对照组用1mL的去离子水或有机溶剂处理。干燥后在每一玻璃管内加1mL去离子水以湿润滤纸，用留一小孔的塞子或塑料薄膜封住玻璃管口。