作者:宋检 时间:2022-11-30 来源:互联网
DSM公司近期公开的专利WO2017109091A1通过改造酿酒酵母胞内的辅因子氧化途径,提供了一种增加宿主细胞生产琥珀酸、富马酸或苹果酸等二羧酸的方法。
苹果酸、富马酸和琥珀酸等四碳二羧酸可以作为许多化学品合成前体,能用于生产除冰剂,食品添加剂,化妆品添加剂,表面活性剂或聚合物等。例如,琥珀酸转化为1,4-丁二醇(BDO),四氢呋喃和γ-丁内酯,可以连接琥珀酸和BDO制成的聚酯聚合物。
在已有专利(WO2013/004670)酿酒酵母菌株SUC-632出发通过经典菌株改良策略获得SUC-708,整合大肠杆菌的富马酸酶基因(fumB)获得SUC-813,通过替换PDC6基因过表达酿酒酵母富马酸还原酶FRD1基因获得SUC-947。SUC-947通过Cre酶介导的同源重组的方法先后敲除线粒体外部NADH脱氢酶、线粒体甘油-3-磷酸脱氢酶、胞质甘油-3-磷酸脱氢酶等在胞内催化辅因子(NADH、NADPH或FADH2)氧化的酶基因获得工程菌株SUP-007。SUP-007在补料分批发酵中琥珀酸的发酵产量与SUC-947相比增加了6%。
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