食品添加剂 环己基氨基磺酸钠(甜蜜素)检测

甜蜜素属于人工合成甜味剂，其甜度为蔗糖的30～40倍，而价格仅为蔗糖的3倍，而且不像糖精那样用量稍多时有苦味，是食品生产中常用的添加剂。消费者如果经常食用甜蜜素含量超标的食品，会对人体的肝脏和神经系统造成危害，特别是对代谢排毒能力较弱的老人、孕妇、小孩危害更明显。目前美国、日本等40多个国家已经禁止在食品中使用甜蜜素。我国的《GB2760-2011食品安全国家标准食品添加剂使用标准》对甜蜜素在不同类型食品中的*大使用量作了规定，如在冷饮、面包、饼干等食品中，*大使用量为0.65g/kg(以环己基氨基磺酸计)，用于话梅的*大使用量为8.0g/kg。

食品中甜蜜素的测定方法有气相色谱法、比色法、薄层层析法。气相色谱法及比色法适用于饮料等食品中环己基氨基磺酸钠的测定；薄层层析法适用于饮料、果汁、果酱、糕点中环己基氨基磺酸钠的含量测定。

下面介绍气相色谱法(依据GB/T5009.97-2003**法)。

(1)原理在硫酸介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸反应，生成环己醇亚硝酸酯，利用气相色谱法进行定性和定量。

(2)试剂

①正己烷。

②氯化钠。

③层析硅胶(或海砂)。

④亚硝酸钠溶液(50g/L)。

⑤硫酸溶液(100g/L)。

⑥环己基氨基磺酸钠标准溶液(含环己基氨基磺酸钠>98%)：精确称取1.0000g环己基氨基磺酸钠，加水溶解并定容至100mL。此溶液每1mL含环己基氨基磺酸钠10mg。

(3)仪器

①气相色谱仪(附氢火焰离子化检测器)。

②旋涡混合器。

③离心机。

④10uL 微量注射器。

(4)操作步骤

①试样制备。

a.液体试样：摇匀后直接称取。含二氧化碳的试样先加热除去，含酒精的试样加40g/L氢氧化钠溶液调至碱性，于沸水浴中加热除去，制成试样。称取20.0g试样于100mL具塞比色管，置于冰浴中。

b.固体试样：凉果、蜜钱类样品将其剪碎后称取2.0g于研体中，加少许层析硅胶(或海砂)研磨至呈干粉状，经漏斗倒入100mL容量瓶中，加水冲洗研钵，并将洗液一并转移至容量瓶中，加水至刻度，不时摇动，1h后过滤，即得试样。准确吸取20mL于100mL具塞比色管，置于冰浴中。

②测定。

a.色谱条件

色谱柱：长2m，内径3mm，U形不锈钢柱。

固定相：Chromosorb WAW DMCS 80～100目，涂以10%SE-30。

测定条件：柱温80℃；汽化温度150℃；检测温度150℃；氮气流速为40mL/min、氢气流速为30mL/min、空气流速为300mL/min。

b.标准曲线的制备：准确吸取1.00mL环己基氨基磺酸钠标准溶液于100mL具塞比色管中，加水20mL，置冰浴中，加入5mL 50g/L亚硝酸钠溶液、5mL 100g/L硫酸溶液，摇匀，在冰浴中放置30min，并经常摇动。然后准确加入10mL正己烷、5g氯化钠，摇匀后置于漩涡混合器上振动1min(或振摇80次)，待静置分层后吸出己烷层于10mL具塞离心管中进行离心分离。每1mL己烷提取液相当于lmg环己基氨基磺酸钠，将标准提取液进样1～5uL于气相色谱仪中，根据响应值绘制标准曲线。

c.样液的测定：试样管按步骤b自“加入5mL 50g/L亚硝酸钠溶液……”起依法操作，然后将试样提取液同样进样1～5uL，测得响应值，从标准曲线图中查出相应含量。

(5)结果计算

式中X——试样中环已基氨基磺酸钠的含量，g/kg

m——试样质量，g

V——进样体积，μL

10——正己烷加入量，mL

m₁——测定用试样中环己基氨基磺酸钠的质量，ug

计算结果保留两位有效数字。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的**差值不得超过算术平均值的10%。

(6)要点提示

①适用于饮料、凉果等食品中环己基氨基磺酸钠的测定，检出限为4ug。

②含二氧化碳的试样先加热除去二氧化碳，含酒精的试样加氢氧化钠溶液调至碱性，于沸水浴中加热除去。

③环已基氨基磺酸钠与亚硝酸钠的反应必须在冰浴中进行。