食品添加剂 糖精钠检测

糖精钠是广泛使用的一种人工合成甜味剂，化学名称为邻苯甲酰磺酰亚胺钠，是糖精的钠盐。其甜度约为蔗糖的450～550倍，浓度低时呈甜味，浓度高时有苦味。除了在味觉上引起甜的感觉外，糖精钠对人体无任何营养价值。相反，当食用较多的糖精时，会影响肠胃消化酶的正常分泌，降低小肠的吸收能力，使食欲减退。短时间内食用大量糖精，易引起血小板减少而造成急性大出血、多脏器损害等，同时也易引发恶性中毒事件。目前我国《GB2760-2011食品安全国家标准食品添加剂使用标准》对其在不同类型食品中的*大使用量作了规定，如在冷饮、面包、饼干等食品中，糖精钠的*大使用量为0.15g/kg(以糖精计)，用于话梅的*大使用量为5.0g/kg。

食品中糖精钠的测定有高效液相色谱法、薄层色谱法和离子选择电*测定法三种国家标准方法。以下介绍薄层色谱法(依据GB/T5009.28-2003第二法。

(1)原理在酸性条件下，食品中的糖精钠用乙醚提取、浓缩、薄层色谱分离、显色后，与标准比较，进行定性和半定量测定。

(2)试剂

①无水硫酸钠。

②盐酸(1+1)：取100mL盐酸，加水稀释至200mL。

③氢氧化钠溶液(40g/L)。

④硫酸铜溶液(100g/L)：称取10g CuSO₄·5H₂O，用水溶解并稀释至100mL。

⑤乙醚：不含过氧化物。

⑥无水乙醇及95%乙醇。

⑦聚酰胺粉：200目。

⑧展开剂如下：

a.正丁醇+氨水+无水乙醇(7+1+2)；

b.异丙醇+氨水+无水乙醇(7+1+2)。

⑨显色剂：溴甲酚紫溶液(0.4g/L)：称取0.04g溴甲酚紫，用乙醇(50%)溶解，加氢氧化钠液(4g/L)1.1mL调节pH为8，定容至100mL。

⑩糖精钠标准溶液：准确称取0.0851g经120℃干燥4h后的糖精钠，加乙醇溶解，移入100mL容量瓶中，加乙醇(95%)稀释至刻度，此溶液每1mL相当于1mg糖精钠(C₆H₄CONNaSO₂·2H₂O)。

(3)仪器

①玻璃纸：生物制品透析袋纸或不含增白剂的市售玻璃纸。

②玻璃喷雾器。

③微量注射器。

④紫外光灯：波长253.7nm。

⑤薄层板：10cm×20cm或20cm×20cm。

⑥展开槽。

(4)操作步骤

①试样提取。

a.饮料、冰棍、汽水：取10.0mL均匀试样(如试样中含二氧化碳，先加热除去；如试样中含有酒精，加4%氢氧化钠溶液使其呈碱性，于沸水浴中加热除去)，置于100mL分液漏斗中，加2mL盐酸(1+1)，用30，20，10mL乙醚提取三次，合并乙醚提取液，用5mL盐酸酸化的水洗涤一次，弃去水层。乙醚层通过无水硫酸钠脱水后，挥发乙醚，加2.0mL乙醇溶解残留物，密塞保存，备用。

b.酱油、果汁、果酱等：称取20.0g或吸取20.0mL均匀试样，置于100mL容量瓶中，加水至约60mL，加20mL硫酸铜溶液(100g/L)，混匀，再加4.4mL氢氧化钠溶液(40g/L)，加水至刻度，混匀，静置30min，过滤，取50mL滤液于150mL分液漏斗中，以下按步骤a中自“加2mL盐酸(1+1)……”起依法操作。

c.固体果汁粉等：称取20.0g磨碎的均匀试样，置于200mL容量瓶中，加100mL水，加温使其溶解、放冷，以下按步骤b中自“加20mL硫酸铜溶液(100g/L)……”起依法操作。

d.糕点、饼干等蛋白质、脂肪、淀粉多的食品：称取25.0g均匀试样，置于透析用玻璃纸中，放入大小适当的烧杯内，加50ml.氢氧化钠溶液(0.8g/L)。调成糊状，将玻璃纸口扎紧，放入盛有200mL氢氧化钠溶液(0.8g/L)的烧杯中，盖上表面皿，透析过夜。量取125mL透析液(相当于12.5g试样)，加约0.4mL盐酸(1+1)，使成中性，加20mL硫酸铜溶液(100g/L)，混匀，再加4.4mL氢氧化钠溶液(40g/L)，混匀，静置30min，过滤。取120mL(相当于10g试样)，置于250mL分液漏斗中，以下按步骤a中自“加2mL盐酸(1+1)……”起依法操作。

②薄层板的制备：称取1.6g聚酰胺粉，加0.4g可溶性淀粉，加约7.0mL水，研磨3～5min，立即涂成0.25～0.3mm厚的10cm×20cm的薄层板，室温干燥后，在80℃下干燥lh。置于干燥器中保存。

③点样：在薄层板下端2cm处，用微量注射器点10uL和20uL的样液两个点，同时点3.0，5.0，7.0，10.0uL糖精钠标准溶液，各点间距1.5cm。

④展开与显色：将点好的薄层板放入盛有展开剂(正丁醇+氨水+无水乙醇或异丙醇+氨水+无水乙醇)的展开槽中，展开剂液层约0.5cm，并预先已达到饱和状态。展开至10cm，取出薄层板，挥干，喷显色剂，斑点显黄色，根据试样点和标准点的比移值进行定性，根据斑点颜色深浅进行半定量测定。

(5)结果计算

式中x——试样中糖精钠的含量，g/kg或g/L

m₁——测定用样液中糖精钠的质量，mg

m——试样质量或体积，g或mL

V₁——试样提取液残留物加入乙醇的体积，mL

V₂——点样液体积，mL

(6)要点提示

①样品提取时加入硫酸铜和氢氧化钠用于沉淀蛋白质，防止用乙醚萃取时发生乳化。

②样品处理液酸化的目的是使糖精钠转化为糖精，以便用乙醚提取。因为糖精易溶于乙醚而糖精钠难溶于乙醚。

③富含脂肪的样品，为防止用乙醚萃取时发生乳化，可先在碱性条件下用乙醚萃取脂肪，然后酸化，再用乙醚提取糖精。

④因酒精溶于乙醚、又可溶于水，当用乙醚提取糖精时易乳化，分层不清，故含酒精的饮料应加热挥去酒精。

⑤聚酰胺薄层板，烘干温度不应高于80℃，否则聚酰胺可能变色。