1 安全提示
本标准试验方法中使用的部分试剂具有毒性或腐蚀性,按相关规定操作,操作时须小心谨慎。若溅到皮肤上应立即用水冲洗,严重者应立即治疗。在使用挥发性酸时,需在通风橱中进行。
2 一般规定
除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682—2008规定的三级水。
试验方法中所用的标准滴定溶液,杂质测定用标准溶液,制剂及制品,在没有注明其他要求时,均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备。
3 鉴别试验
3.1 试剂和材料
3.1.1 三氯甲烷。
3.1.2 三氯化锑溶液:250g/L三氯甲烷溶液,如果需要,应过滤后使用。
3.1.4 三氯化锑试液:200g/L三氯甲烷溶液。如果需要,应过滤后使用。
3.2 呈色试验
3.2.1 方法提要
维生素A和亲电试剂氯化高锑作用形成不稳定的蓝色碳鎓离子。
3.2.2 分析步骤
取1滴实验室样品,加10mL三氯甲烷,振摇使溶解;取出2滴,加2mL三氯甲烷、0.5mL三氯化锑溶液,即显蓝色,渐变成紫红色。
3.3 薄层层析
3.3.1 方法提要
实验室样品溶液所显示主斑点与维生素A对照品溶液所显示主斑点的R值相同。
3.3.2 分析步骤
分别称取维生素A对照品和实验室样品约15000IU置于10mL容量瓶中,用三氯甲烷溶解并稀释至刻度,然后在硅胶薄层板上分别点样0.01mL,在展开剂中展开,展开后,晾干。用三氯化锑试液显色,呈蓝色斑点。实验室样品溶液所显示主斑点与对照品溶液所显主斑点的位置一致。
4 维生素A的测定
4.1 方法提要
维生素A分子中含有5个共轭双键,在325nm~328nm波长具有*大吸收峰,其*大吸收峰的位置随溶剂不同而异,因而可用于含量测定。本法是在三个波长处测得吸光度,根据校正公式计算吸光度A校正值后,再计算含量。
4.2 试剂和材料
环己烷。
4.3 仪器和设备
紫外分光光度计。
4.4 测定方法
4.4.1 分析步骤
取实验室样品适量,精确至0.0002g,加环己烷溶解并定量稀释成9~15IU的溶液,按照维生素A测定法(《中华人民共和国药典》2005年版二部附录ⅦJ维生素A测定法项下**法)测定吸收峰的波长,并在表1所列波长处测定吸光度。计算各吸光度与波长328nm处的吸光度的比值和波长328nm处-----154.1---值。
表1 维生素A在不同波长的吸光度比值
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