作者:banjian77 时间:2022-10-19 来源:互联网
事实上,农杆菌介导的植物遗传转化有两个关键过程:农杆菌侵染转化材料及转化材料的再生。各种因素对于转化效率的影响都可以归于对这两个过程的影响,主要包括以下几个方面:
农杆菌菌株。农杆菌作为植物基因转化的工具,其属性对转化的成功有决定性的影响。农杆菌依其代谢冠瘿碱的种类可分为章鱼碱型、农杆碱型、胭脂碱型和琥珀碱型等类型,不同的菌种会影响基因转化的效果。
外植体类型。外植体类型是转化的主要影响因素。不同来源和发育状态的受体都会对农杆菌的侵染产生很大影响。外植体的类型有很多种,如根、茎、芽、子叶、胚胎等,其分生组织细胞完成转基因后必须能从转化处理造成的冲击恢复并快速再生植株,根据试验目的及意义选择合适的材料。
培养基组成。培养基组成包括糖含量、盐浓度、生长调节剂和一些化学物质的加入等,对转化效率有巨大影响。
筛选标记基因。由于在植物基因转化中,外源基因稳定的整合频率低,因此如何选择适当的筛选标记,以有效地分离转化与非转化细胞,且不干扰细胞的正常生长,也不干扰再生植株的产生,是转化成功的重要环节之一。
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