食品添加剂 羟丙基二淀粉磷酸酯检测

A.1 安全提示

本标准的检验方法中使用的部分试剂具有毒性或腐蚀性，操作时应小心谨慎!如溅到皮肤上应立即用水冲洗，严重者应立即治疗。

A.2 一般规定

除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682中规定的三级水。试验方法中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602和GB/T603之规定制备；所用溶液在未指明溶剂时，均指水溶液。

A.3 鉴别试验

A.3.1 显微镜检测

未经糊化处理保持颗粒结构的羟丙基二淀粉磷酸酯，可直接通过显微镜观察鉴定淀粉颗粒形状，大小和特征。在显微镜的偏振光下，可以观察到典型的偏光十字。

A.3.2 碘染色

将1g的试样加入20mL的水中配成悬浮液，滴入几滴碘液，颜色范围应为深蓝色到棕红色。

A.3.3 铜还原

A.3.3.1 碱性酒石酸铜试液的配制

A.3.3.1.1 溶液A：取硫酸铜(CuSO₄·5H₂O)34.66g，应无风化或吸潮现象，加水溶解定容到500mL。将此溶液保存在小型密封的容器中。

A.3.3.1.2溶液B：取酒石酸钾钠(KNaCH₄O₆·4H₂O)173g与氢氧化钠50g，加水溶解定容到500mL。将此溶液保存在小型耐碱腐蚀的容器中。

A.3.3.1.3 溶液A和溶液B等体积混合，即得碱性酒石酸铜试液。

A.3.3.2 分析步骤

称取试样2.5g，置于一烧瓶中，加入0.82mol/L的盐酸溶液10mL和水70mL，混合均匀，沸水浴回流3h，冷却。取0.5mL冷却溶液，加入5mL热碱性酒石酸铜试液，产生大量红色沉淀物。

A.4 羟丙基的测定

A.4.1 方法原理

羟丙基二淀粉磷酸酯在硫酸中生成丙二醇，丙二醇再进一步脱水生成丙醛和丙烯醇，这两种脱水产物在硫酸介质中可与茚三酮生成紫色络合物。用分光光度计在590nm处测其吸光度，浓度范围5～50mg，符合朗伯-比尔定律。

A.4.2 试剂和材料

A.4.2.1 硫酸。

A.4.2.2 茚三酮。

A.4.2.3 亚硫酸氢钠。

A.4.2.4 茚三酮溶液：将茚三酮溶于5%亚硫酸氢钠溶液中，配制成3%的茚三酮溶液。

A.4.2.5 硫酸溶液：c(1/2H₂SO₄)=1.0mol/L。

A.4.2.6 1,2-丙二醇。

A.4.2.7 淀粉：具有相同植物来源的未变性淀粉。

A.4.3 仪器和设备

分光光度计。

A.4.4 分析步骤

A.4.4.1 标准溶液的配制

制备1.00mg/mL的1,2-丙二醇标准溶液，分别吸取1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL此标准溶液于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，得到浓度分别为10ug/mL、20ug/mL、30ug/mL、40ug/mL和50ug/mL的标准溶液。

A.4.4.2 试样溶液的配制

称取50mg～100mg试样，精确至0.1mg，置于100mL容量瓶中，加入硫酸溶液25mL。于沸水浴中加热至试样溶解，冷却后用水稀释至100mL。必要时可进一步稀释，以保证每100mL中所含的羟丙基不超过4mg，然后按相同比例稀释空白淀粉。

A.4.4.3 测定

取5种标准溶液各1mL，分别移入25mL具塞刻度试管内，将试管置于冷水中，分别滴加硫酸8mL，混匀后将试管置于沸水浴内准确加热3min，立即将试管移入冷水浴降温。沿试管壁小心加入茚三铜溶液0.6mL，立即摇匀，于25℃水浴中保持100min。用硫酸调整各试管内的体积至25mL，倒转试管数次以混匀(不得摇动)。立即将部分溶液移入分光光度计1cm比色池内，静置5min后，在590mm处测定吸光值，绘制标准曲线。

吸取试样溶液1mL，移入25mL具塞刻度试管内，按照标准溶液的测定过程进行后续操作，以淀粉空白液作为参比，测定的吸光值。

A.4.5 结果计算

羟丙基的质量分数w0，按公式(A.1)计算：

式中：

c——从标准曲线中读取的样品溶液中丙二醇含量，单位为微克每毫升(ug/mL)；

0.7763——丙二醇含量转化为羟丙基含量的转化系数；

f——试样稀释后的*终体积，单位为毫升(mL)；

m——试样质量，单位为毫克(mg)；

1000——换算因子。