食品添加剂 维生素B<Sub>1</Sub>（盐酸硫胺）检测

　　1 安全提示

　　本标准试验方法中使用的部分试剂具有毒性或腐蚀性，按相关规定操作，操作时需小心谨慎。若溅到皮肤上应立即用水冲洗，严重者应立即治疗。在使用挥发性酸时，要在通风橱中进行。

　　2 一般规定

　　本标准所用试剂除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T 6682-2008中规定的三级水。

　　试验方法中所需标准滴定溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T603之规定制备。

　　3 鉴别试验

　　3.1 试剂和材料

　　3.1.1 正丁醇。

　　3.1.2 二氧化锰。

　　3.1.3 硫酸。

　　3.1.4 氢氧化钠溶液：40g/L。

　　3.1.5 铁氰化钾溶液：100g/L。

　　3.1.6 淀粉指示液：5g/L。

　　3.1.7 碘化钾淀粉试纸：取滤纸条浸入含有0.5g碘化钾的新制的淀粉指示液100mL中，湿透后，取出干燥，即得。

　　3.2 鉴别方法

　　3.2.1 硫化物的显色鉴别

　　3.2.1.1 方法原理

　　维生素B1(盐酸硫胺)在碱性溶液中，易被铁氰化钾氧化生成硫色素，硫色素易溶于正丁醇中，显强烈的蓝色荧光。

　　3.2.1.2 分析步骤

　　称取约5mg实验室样品，加2.5mL氢氧化钠溶液溶解后，加0.5mL铁氰化钾溶液与5mL正丁醇，剧烈振摇2min,放置使分层，上面的醇层显强烈的蓝色荧光;加酸使成酸性，荧光即消失;再加碱使成碱性，荧光又显出。

　　3.2.2 氯化物的鉴别

　　称取约0.5g实验室样品，置干燥试管中，加0.5g二氧化锰，混匀，加硫酸湿润缓缓加热，即产生氯气，能使湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色。

　　4 维生素B1的测定

　　4.1 方法原理

　　维生素B1(盐酸硫胺)分子中含有碱性的已成盐的伯胺和季铵基团，在非水溶液中(在乙酸汞存在下)均可与高氯酸作用。根据消耗高氯酸的量计算维生素Bl的含量。

　　4.2 试剂和材料

　　4.2.1 冰乙酸。

　　4.2.2 乙酸汞溶液：50g/L冰乙酸溶液。

　　4.2.3 高氯酸标准滴定溶液：c(HClO4)=0.1mol/L。

　　4.2.4 喹哪啶红-亚甲蓝混合指示液：0.3g喹哪啶红，0.1g亚甲蓝，加甲醇至100mL。

　　4.3 分析步骤

　　取约150mg实验室样品，精确至0.0001g,加20mL冰乙酸，在微热水浴中超声溶解，稍冷，加5mL乙酸汞溶液，2滴喹哪啶红-亚甲蓝混合指示液，以高氯酸标准滴定溶液滴定至天蓝色，强烈振摇，30s不褪色为终点，并将滴定的结果用空白试验校正。

　　4.4 结果计算

　　维生素B1(盐酸硫胺，以C12H17ClN4OS·HCl计)的质量分数w1，数值以%表示，按公式(1)计算：

　　式中：

　　V—样品消耗高氯酸标准滴定溶液的体积的数值，单位为毫升(mL);

　　V0—空白试验消耗高氯酸标准滴定溶液的体积的数值，单位为毫升(mL);

　　C—高氯酸标准滴定溶液的实际浓度的数值,单位为摩尔每升(mol/L);

　　m—实验室样品的质量的数值,单位为克(g);

　　w2——8测得的干燥减量的数值，%;

　　M—维生素B1(1/2C12H17ClN4OS∙HCl)的摩尔质量的数值，单位为克每摩尔(g/mol)(M=168.6)。

　　取平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果的允许**差值在0.3%以内。

　　5 PH的测定

　　称取约0.50g实验室样品，精确至0.01g,加20mL水溶解后,用酸度计测定pH。